Det grundlæggende princip for DNA-syntese

Den kemiske DNA-syntese er baseret på fastfase-syntesestrategien og phosphoramiditkemi.Forskelligt fra den biologiske DNA-syntese er materialet i kemisk DNA-syntese DMT (4, 4-dimethoxytrityl) og phosphoramidit-modificeret deoxyriboxysid, som vist i figur 1. DNA-syntesen udføres på det faste underlag (vi kan tilbyde forskellige afOligosyntesesøjle), dvs. CPG (kontrolleret poreglas) og PS (polystyren), og hele syntesen udføres på enDNA/RNA synthesizer, som er vores hovedudstyr, har forskellige modeller såsom: HY Single Channel Synthesizer, HY-12, HY-192 og etc, synteseretningen er fra 3' til 5', og et nukleotid introduceres til den faste understøtning via en syntese cyklus.En typisk syntesecyklus indeholder fire trin, afbeskyttelse, kobling, dækning og oxidation (figur 2).Afbeskyttelsen er indstillet til at fjerne DMT-gruppen på den faste bærer eller 5'-hydroxylgruppen på det tidligere nukleosid, 3% trichloreddikesyre i dichlormethan anvendes som afbeskyttelsesreagens.Derefter fik det phosphoramiditmodificerede deoxyriboxysid lov til at udsætte hydroxylgruppen ved hjælp af aktivator, dvs. 5-ethylthiotetrazol eller 4,5-dicyanoimidazol, der danner phosphitetriesteren (III), og realiserede koblingstrinnet.Et capping-trin udføres for at blokere den uomsatte hydroxylgruppe under koblingstrinnet for at minimere dannelsen af ​​uønskede defektsekvenser.Til sidst oxideres den ustabile phosphitetriester (III) til kemisk stabil phosphortriester (V) med jod som oxidationsmiddel i pyridinens tilstedeværelse.

Det syntetiserede DNA kunne spaltes fra det faste underlag ved aminolyse, den 2-cyanoethylbeskyttede gruppe på phosphortriesteren og amidet på nukleobasen spaltes på samme tid, syntesepladerne og syntesesøjlerne i stativer placeres direkte i reaktionskammeret afAfbeskyttelsesudstyr.Rå-DNA kan fremstilles ved HPLC, elektroforese og OPC efter behov, vi kan også give dig detUdstyr til rensningtil efterbehandling.