Renseudstyr til Oligo-rensning

1. Oprensning af gelelektroforesekromatografi
Brug denaturerende polyacrylamidgelelektroforesekromatografi til oprensning.Denatureringsmidlet er generelt 4M formamid eller 7M urinstof, koncentrationen af ​​akrylamid er mellem 5-15%, og andelen af ​​methacrylamid er hovedsageligt mellem 2-10%.
Efter elektroforese skal positionen af ​​nukleinsyrebåndet bestemmes under bestråling af ultraviolet lys, gelen indeholdende målnukleinsyren afskæres, nukleinsyren knuses og udvaskes, og derefter koncentreres udvaskningsopløsningen, afsaltes, kvantificeret og lyofiliseret.

2. DMT-On, HPLC-rensning
Vælg DMT-On-tilstanden under syntesen, råproduktet blev centrifugeret og koncentreret ved stuetemperatur for at fjerne overskydende ammoniak efter aminolysen.
Separation blev udført under anvendelse af en C18-søjle med acetonitril og 10% triethylamin-eddikesyre (TEAA) som eluent.Efter at elueringen er afsluttet, koncentreres den, og derefter fjernes DMT-gruppen med trifluoreddikesyre.Efter neutralisering fjernes nogle salte og små molekyler gennem et afskæringsrør og afsaltes til sidst.

Denne metode kan opnå et produkt med højere renhed, men det er nødvendigt at være opmærksom på forekomsten af ​​depurinering.

3. DMT-Off, HPLC-rensning
Vælg DMT-Off under syntesen, og råproduktet blev centrifugeret og koncentreret ved stuetemperatur for at fjerne overskydende ammoniak efter ammonolyse.
Adskillelse blev udført under anvendelse af en C18-søjle med acetonitril og 10% triethylamin-eddikesyre i vand som eluent.Efter at adskillelsen er afsluttet og kvantificeret, lyofiliseres portionerne.

Denne metode kræver omhyggelig justering af separationsbetingelser og kan også opnå relativt rene målmolekyler.