I den typiske DNA-, RNA- og ikke-naturlige nukleinsyresyntese spiller afbeskyttelses- og koblingstrinnet afgørende roller.
Afbeskyttelsestrinet er at fjerne DMT-gruppen på den faste bærer eller 5'-hydroxylgruppen på det foregående nukleosid med organisk syre og eksponere hydroxylgruppen til det følgende koblingstrin.3% trichloreddikesyre i dichlormethan eller toluen bruges for det meste til at udføre afbeskyttelsestrinet.Koncentrationen af trichloreddikesyre og afbeskyttelsestiden (afblokeringstiden) dominerer renheden af slutprodukterne.Lav koncentration og utilstrækkelig afblokeringstid efterlader ureageret DMT-gruppe, som reducerer udbyttet og øger de uønskede urenheder.Den lange afblokeringstid kan føre til depurin af syntetiserede sekvenser, hvilket danner de uventede urenheder.
Koblingstrinnet er følsomt over for vandindholdet i opløsningsmidler og fugten i luften.Koncentrationen af vand i syntesen bør være mindre end 40 ppm, bedre mindre end 25 ppm.For at bevare den vandfrie syntesetilstand bør nukleinsyresyntesen udføres i et miljø med lav luftfugtighed, så vi anbefaler vores kunde at brugeAmiditter opløst udstyr, som kan opløse den pulveriserede eller olieagtige Phosphoramidit i vandfri acetonitril for at undgå kontakt med luft.
Siden opløsningen af phosphoramiditer er det bedre i ikke-vand situationen, og molekylære fælder til at adsorbere sporvandet i reagenserne og amidit, er det nødvendigt at forberedeMolekylære fælder.Vi anbefaler 2 g undersigt til 50-250 ml reagensflasker, 5 g til 250-500 ml reagensflasker, 10 g til 500-1000 ml reagensflasker og 20 g til 1000-2000 ml reagensflasker.
Opløsningen af phosphoramiditter bør udføres under den inerte atmosfære, og udskiftningen af aktivatorreagenser og acetonitril bør afsluttes i tide.Capping- og Oxidationsreagenserne skal bruges så hurtigt som muligt, de åbnede reagenser giver mindre holdbarhed og mindre aktivitet under syntese.
Indlægstid: Aug-09-2022